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口蹄疫疫苗純化工藝路線之重組標(biāo)簽蛋白工藝

2024. 11. 26
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口蹄疫是畜牧業(yè)最嚴(yán)重的傳染病之一,病毒粒子直徑約為23~25nm,呈圓形或六角形,具有20面體對稱性。目前沒有有效治療辦法,疫苗注射為主要的防治手段。國內(nèi)主要分為重組口蹄疫疫苗口蹄疫滅活疫苗兩種,針對這兩類口蹄疫疫苗純化工藝,小編將分兩期內(nèi)容進(jìn)行介紹,本期為第一期重組口蹄疫疫苗工藝路線介紹。


口蹄疫重組蛋白VLP疫苗特點(diǎn)

口蹄疫疫苗根據(jù)抗原的形態(tài)構(gòu)象可分為合成肽、表位蛋白、病毒樣顆粒和完整病毒粒子四種,但由于合成肽與表位蛋白免疫效力較弱,所以國內(nèi)主要有口蹄疫重組蛋白VLP(病毒樣顆粒)和口蹄疫全病毒滅活疫苗兩種。


這期,小編主要介紹重組蛋白VLP疫苗。首先重組蛋白VLP疫苗是通過基因工程使病毒帶有His標(biāo)簽的結(jié)構(gòu)蛋白(如衣殼蛋白)在真核細(xì)胞或原核細(xì)胞體系中表達(dá),經(jīng)過純化、酶切、換液等操作后,使其自組裝成VLPs(圖1為推薦工藝)。這些VLPs具有與自然病毒相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),能有效模擬自然病毒的抗原表位。由于其不含核酸,無散毒風(fēng)險,安全性高,同時可以在不繁殖活毒的情況下生產(chǎn),避免生物安全風(fēng)險。除此之外還有著能夠區(qū)分感染動物和免疫動物,易于實(shí)現(xiàn)多價或多聯(lián)疫苗的開發(fā)的優(yōu)勢,所以擁有較大的市場發(fā)展?jié)摿Α?/span>
口蹄疫疫苗純化工藝路線之重組標(biāo)簽蛋白工藝

1His標(biāo)簽蛋白純化工藝路線


口蹄疫重組蛋白疫苗純化工藝

在口蹄疫重組蛋白VLP(病毒樣顆粒)制備中,基因克隆、表達(dá)載體構(gòu)建、蛋白純化工藝優(yōu)化等都是非常重要的部分。其中,針對His標(biāo)簽的結(jié)構(gòu)蛋白純化工藝,小編推薦His標(biāo)簽蛋白專用純化介質(zhì)。該介質(zhì)特點(diǎn)為:聚合物基質(zhì)的Ni親和純化介質(zhì)通過柔性親水修飾后,在兼具瓊脂糖良好生物相容性的同時,可保持聚合物的剛性結(jié)構(gòu),有著高耐壓,抗污染性好,可高流速上樣的優(yōu)點(diǎn),可快速從細(xì)胞破碎液/培養(yǎng)液中捕獲His標(biāo)簽融合蛋白,更適合大規(guī)?;I(yè)級生產(chǎn)(圖2為His標(biāo)簽蛋白純化介質(zhì)純化結(jié)果)。

口蹄疫疫苗純化工藝路線之重組標(biāo)簽蛋白工藝

圖2:His標(biāo)簽口蹄疫蛋白純化結(jié)果

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上述內(nèi)容中涉及到的His標(biāo)簽蛋白純化介質(zhì)根據(jù)螯合配基的種類分為三類:亞氨基二乙酸(IDA)、次氨基三乙酸(NTA) 、乙二胺三乙酸(TED),相關(guān)參數(shù)及性質(zhì)如下,可根據(jù)自身情況作出相應(yīng)選擇(產(chǎn)品信息如圖3所示)。

口蹄疫疫苗純化工藝路線之重組標(biāo)簽蛋白工藝

圖3:His標(biāo)簽蛋白純化介質(zhì)產(chǎn)品參數(shù)

本系列涉及的純化介質(zhì)由于其高強(qiáng)度,高穩(wěn)定性,以及柔性親水修飾技術(shù)與微納結(jié)構(gòu)控制專利技術(shù)的支撐,使其適合在大分子蛋白/病毒的純化過程中,不僅可以有效去除雜蛋白,還可以很好的保護(hù)目標(biāo)蛋白與病毒活性。目前已經(jīng)與多家疫苗生產(chǎn)廠家深入合作,取得了優(yōu)異的效果,歡迎大家前來選購。


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